美吉生物

常規測序及其他服務 克隆服務 TA克隆

TA克隆 生信分析 技術參數 常見問題 留言咨詢

        通過PCR的方法擴增目的基因片斷的過程中,由于往往不清楚目的基因的DNA序列,獲得的目的片斷通常需要通過TA克隆的方法,重組到T-載體中,通過載體上通用引物測定DNA序列。TA克隆是目前克隆PCR產物最簡便、快捷的方法。


美吉優勢

1.快速、高質量的服務,一般4~7個工作日出結果。

2.T載體可選擇PMD19T。


實驗原理





1.請提供克隆片段的相關信息,包括名稱、大小、樣品是否帶有“A”尾以及PCR產物是否已純化。已純化的PCR產物請確保使用的溶劑為滅菌的雙蒸水。
2. PCR已純化樣品:濃度≥20ng/μl,體積≥20μl;PCR未純化樣品:濃度≥50ng/μl,體積≥25μl。所需DNA的總量會隨片段大小的不同而有所變化。

3.請務必在訂單上注明PCR所用引物序列,以便用于克隆結果的核對分析。
4.當克隆結果中包含客戶提供的單向部分引物序列,我們即視實驗成功,將收取全額的實驗費用。
5.若序列中包含高GC、Poly等特殊或復雜結構導致測序中斷,我們即視實驗成功,將收取全額的實驗費用。


(1) 為什么我挑出來的菌落是空載?

 答:①、您在PCR擴增的時候最后一步沒有加A尾,導致沒有連上載體;

 ②、您的擴增產物可能因為放置時間過長,有掉A尾的現象發生;

 ③、加的模板量過少,有些片段沒有插入到載體里面。


(2) 你們涂平板大概多長時間?

答:我們涂平板一般都是過夜培養。


(3) 你們連接的時間大概是多少,溫度是多少?

答:連接的溫度是16℃,連接時間最少2個小時,片段越長,連接的時間就越長。


(4) 在我收到的結果里,為什么有時候會有XXXXX的東西?

答: 這些XXXX代表的是載體的序列,我們給您發送的結果是去過載體的序列,因此會有XXXX出現。


填寫資料 (電話、郵編和備注選填,其余均為必填項)

微信掃一掃

幸运农场 一点咨询怎么赚钱 什么人在比特币赚钱 在哪个城打工赚钱 大学公众号如何赚钱吗 手机麻将平台 南昌麻将算子规则图片 那种自媒体比较赚钱 赚钱上瘾的诗句 秦始皇守城赚钱修长城小游戏 特区彩票安卓 创建一个网站流量赚钱吗 淘宝做任务怎么赚钱吗 欢乐捕鱼大战怎么获得冰冻道具 24小时红中麻将微信群 卖汽车靠什么赚钱 gta5故事模式赚钱方法